【原 理】
呋喃它酮快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样本中的呋喃它酮在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上呋喃它酮-BSA偶联物的结合。如果样本中呋喃西林含量大于0.5ng/ml,检测线(T)线显色比C线浅,或T线无显色,结果为阳性;检测线(T)线显色比C 线(对照线)深或一样深,结果为阴性。
【试剂组份】
呋喃它酮快速检测卡;一次性塑料吸管;10倍浓缩缓冲液;衍生化试剂;50ml离心管;15ml离心管;说明书;一次性塑料手套。
【样品处理】
1.取50-100g的去脂肪组织样品,用剪刀剪碎,放入粉碎机打碎;
2.称取3g打碎样品于50 ml离心管中,并加入12ml去离子水或蒸馏水,1.5ml 1M盐酸,0.3ml衍生化试剂,充分混合1min;
3.60℃水浴条件下孵育 30min;
4.取出后加入15ml 0.1M磷酸氢二钾,1.2ml 1M氢氧化钠,加入乙酸乙酯15ml,充分混合1min ,4000转/分钟,离心 5min(或分装于4个15ml离心管,4000转/分钟,离心 5min);
5.移取上层溶液 8ml于15ml离心管中,用吹干仪65℃下空气吹干;
6.取10倍浓缩缓冲液释成1倍缓冲液备用(取10倍浓缩缓冲液0.1ml加入去离子水或蒸馏水0.9ml即为1倍缓冲液);
7.向吹干的试管中加入 2ml正己烷,加盖振荡 1min,然后加入0.32ml 1倍缓冲液,充分混匀,4000转/分钟,离心5min(或静置至明显分层);
8.吸取 0.1ml下层溶液,待检。
【检测程序】
⑴ 在进行测试前先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和待检样本溶液恢复至室温(20℃~30℃);
⑵ 从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面,
如上图右侧所示(打开后请立即使用);
⑶ 吸取待检样品溶液60~80微升于加样孔中(见上图),加样后开始计时;
⑷ 结果应在3~5分钟读取,其他时间判读无效。
【结果判断】
阴性(-):T线显色(检测线,靠近加样孔一端)比C线(对照线)深或一样深,表示样品中呋喃它酮代谢物浓度低于检测限或不含呋喃它酮代谢物。
阳性(+):T 线显色比 C 线浅,或 T 线无显色,表示样品中呋喃它酮代谢物残留浓度高于检测限,T 线显色比 C线越浅,表示样品中呋喃它酮代谢物残留浓高。
无效:未出现 C线,可能是操作不当或试剂板已失效。应再次阅读说明书,并用新的试剂板重新测试。
【贮藏及有效期】
4~30℃阴凉干燥处避光保存;有效期为12个月 (生产日期及批号见包装盒)
【注意事项】
1. 检测过程必须20℃~30℃环境下进行;
2. 检测时请佩戴手套;
3. 切勿食用配备的试剂;
4. 请勿使用过期的试剂板;
5. 不要触摸试剂板中央的白色膜面;
6. 切勿重复使用配备的滴管,以免交叉污染。
【交叉反应率】
SEM…………………………………100
AOZ………………………………<
0.1
AHD…………………………………<
0.1
AMOZ…………………………………<
0.1
【精密度】
同时使用本产品和呋喃它酮代谢物液相串联质谱法对 150 份样品包括 94 份阴性样本和 56 份阳性样本进行检测,检测结果表明本产品与液相串联质谱法的结果符合率为 98.0%。